要：附红细胞体病简称附红体病，是由附红细胞体寄生于红细胞表面、血浆及骨髓所引起的人畜共患传染性疾病。附红细胞体感染犬后常呈亚临床性表现，当犬机体免疫能力下降便可引起该病发生。患犬表现高热、黄疸、溶血性贫血为主要症状，病死率可高达80%，严重危及犬的生命健康。随着临床病例增多而呈暴发趋势流行，附红细胞体病已引起了临床兽医工作者的广泛关注。文章对该病的病原学、流行特点、致病机理、临床表现、实验室检查以及治疗进行了综述，为犬附红细胞体病的研究和治疗提供资料。
关键词：附红细胞体；免疫能力；致病机理
附红细胞体病(Canine eperythrozoonosis)由专性血液寄生生物附红细胞体引起，国内外亦有人称之为黄疸性疾病、类边虫病、赤兽体病和红皮病等。在我国，犬附红细胞体病1991年7月～10月首次发现于上海地区，患犬常呈隐性感染，感染率高，在应激条件下出现急性临床症状，可伴发呕吐、腹泻、便血、脱水等急性出血性胃肠炎症症状[1]。
1 病原学
1.1 分类
附红细胞体既有原虫特点，又有立克次体的特征，长期以来其分类地位尚未完全确定。目前普遍采用1984年第八版《伯杰氏细菌鉴定手册》为分类依据，将附红细胞体划分于立克次体目(Rickettsiares)，无形体科(Anaplasmataceae)，血虫体属，亦称为附红细胞体属。近年来，随着对附红细胞体的深入研究，1997年Neimark H等[2]采用DNA测序、PCR扩增和16 S rRNA序列分析，发现其生物进化树的基因序列与柔膜体科的支原体属较为接近，其同源性可达到80%～90%，这种广泛寄生于脊椎动物的无细胞壁生物在支原体属的肺炎型组内形成一个新的分支，被命名为球形支原体(Mycoplasma coccoides comb nov，MCCN)。Messick J B等[3]和Euzby J[4]用同样的方法，在犬血液中发现的附红细胞体样寄生物被命名为犬嗜血支原体(Mycoplasma haemocanis comb nov，MHCN)。但Uilenberg G G等[5]通过研究发现附红细胞体与支原体属的16 S rRNA基因序列的同源性并不是很高，因此列入同一种属的依据不充分。由于附红细胞体属类的病原微生物主要寄生在红细胞表面并借助吸血昆虫传播，而支原体属的绝大多数病原体以非红细胞为主要寄生对象，且不需要特殊的媒介就可以在哺乳动物及人之间传播。因此，很多学者建议应测定整个附红细胞体基因组序列，结合其他生物学特性确定其种属分类地位。
1.2 形态特点
附红细胞体是一种典型的原核生物，无明显的细胞器和细胞核，是多形态生物体，不同的畜种存在着一定的差异。犬附红细胞体鲜血涂片光学显微镜下观察，多为环球形、圆形、短杆形，少数呈顿号形和杆状。电镜下观察，显示多种形态，无细胞壁，由单层限制膜包裹着，胞膜下可见直径为10 nm的微管[6]，在胞液的外围和中央的稀薄区常见类核糖体样电子致密颗粒聚集，其中电子密度大的类核糖体颗粒无规则的分布在胞浆内，偶尔形成串索。附红细胞体直径通常为0.2 μm～0.8 μm，最大可达2.6 μm。病原寄生于红细胞表面的凹陷中，但不侵入红细胞内，与红细胞膜之间有25 nm～30 nm的间隙，并通过其表面的纤突与红细胞膜接触，这些纤突一旦附着在红细胞表面，则使红细胞膜产生一些小而深的凹陷和变形，改变细胞膜的结构和通透性，使附着的红细胞局部呈锯齿状、菠萝状、星芒状等，个别可见细胞膜表面形成洞。当单个或多个散在的或多个聚成小团状的附着在红细胞表面上时，使红细胞表面有突起，导致红细胞的变形破裂。
1.3 运动性与折光性
血悬滴标本中，单个附红细胞体呈游离态，常作摆动，翻滚，上升，下降等运动，有很强的运动性；附红细胞体聚成团状者其活动能力减弱，只滚动或摆动；当接近红细胞时附红细胞体活动力明显减弱，一旦附着于红细胞时立即停止运动，整个红细胞连同寄生的附红细胞体成为一体，有轻微的摆动、扭动现象。滴加等量的50 mL/L醋酸或10 mL/L盐酸时，红细胞破裂，附红细胞体的活动性加强，运动范围加大；滴加1 g/L碘溶液后，运动停止，此时，即使用PBS或生理盐水洗涤，其活力也不能恢复[7]。
在显微镜下轻轻旋动显微镜微调，可见附红细胞体折光性很强，象一轮轮淡蓝色的宝石(红细胞)，镶着一颗颗闪闪发光的珍珠(附红细胞体)一样。
1.4 生物学特性
附红细胞体苯胺染色易着色，为革兰氏染色阴性，姬姆萨染色呈紫红色，瑞特氏染色为蓝紫色。吖啶橙染色在荧光显微镜下可见各种形状的附红细胞体单体，呈橘黄色。在急性病例中，病原为淡黄色至浅绿色的小点状，不易辨认，通常位于红细胞上或红细胞边缘，位于红细胞边缘变性的附红细胞体更小，通常为绿色点状。
2 流行特点
附红细胞体是人畜共患的疾病，主要寄生于脊椎动物红细胞表面。截至目前，附红细胞体病在世界范围内30多个国家均有报道，感染率的高低与不同地区的气候差异，血吸虫的分布，检测方法有很大关系。附红细胞体宿主特异性强，猪、牛、羊、犬、兔、鸡和人等都是附红细胞体易感动物，其中以猪感染附红细胞体后发病最为严重，犬附红细胞体通常毒力较弱，致病力不强，呈隐性经过。
该病多发于夏秋时高热、多雨且蚊虫繁殖孳生季节，南方发病率高于北方。犬附红细胞体传播途径有接触、昆虫媒介、血源传播等3种方式：①接触传播是指患犬与健康犬之间、患有附红细胞体感染的人群与健康犬之间通过直接接触而发生的传播；②昆虫媒介传播是指经吸血昆虫如虱子、蚊子、蛰蝇等的携带与叮咬而发生的传播，这种传播方式是该病的重要途径；③血源传播是指用了被附红体污染的注射器、针头等医疗器械，或通过互相舔咬破损的伤口传播。其他传播途径，如垂直传播，畜禽中现已在猪、奶牛发现可垂直传播，而鸡的附红细胞体感染不能经卵垂直传播，犬附红细胞体是否可经过垂直传播目前尚无报道。
3 发病机制
附红细胞体的致病机理尚未完全揭示。犬感染附红细胞体后多呈潜伏状态，不一定表现出临床症状。附红细胞体与红细胞有一定亲和性，主要由于红细胞本身的静电引力或受体配体的黏附性使附红细胞体能吸附于红细胞上，并从中吸取养分，使红细胞膜出现损伤，甚至出现空洞[13]。魏梅雄等在试验中发现，红细胞呈空斑样、空泡样或齿轮样病变。由于红细胞被附红细胞体寄生后，其细胞膜通透性增加和膜脆性增高，还有的出现膜凹陷和空洞，使血浆进入红细胞内引起红细胞破裂。当机体免疫力下降或受到其他病原体侵袭时，附红细胞体大量增殖，变形的红细胞增多而不能及时通过脾脏、淋巴结即使被清除，逐渐出现贫血及黄疸。当免疫识别细胞进行自身识别时，将附红细胞体寄生的红细胞误认为是异种抗原，一方面加速机体内各类吞噬细胞(脾、淋巴结、肝、骨髓、脑、血液中以及肠系膜上的固定和游离的大、小吞噬细胞)吞噬这些负荷附红细胞体的红细胞，从而加剧了贫血和血红蛋白尿的形成；另一方面导致机体产生自家抗体招致Ⅱ型过敏反应，产生自身抗体IgM型冷凝素并攻击被感染的红细胞，进一步引起自身免疫溶血性红细胞溶解，加重了贫血和血红蛋白下降。此外，由于附红细胞体大量繁殖，使代谢紊乱，血糖分解上升，引起低血糖。当病犬血清碱性磷酸酶、肌酸激酶和谷草转氨酶活性升高，提示附红细胞体的感染已引起了广泛的组织器官损伤[1415]。最终病犬生理生化值的改变以及部分组织器官严重损伤，导致机体代谢紊乱、酸碱失衡等严重后果，患犬死亡。
4 临床表现及病理变化
该病以贫血、黄疸、发热为基本特征。人和动物多呈隐性经过是附红细胞体常被人们忽视的重要原因，当外界应激因素和病原体侵入等因造成机体抵抗力下降时，患犬表现精神沉郁，食欲不振，被毛粗乱，明显消瘦，眼结膜发红并可出现小出血点，体温升高至40 ℃左右。感染严重的患犬由于贫血造成机体体质虚弱，食欲废绝，强制运动时可导致心率、呼吸加快，尿少而色深黄。临床检查可视黏膜黄染，体温升高至41 ℃左右，大多数感染严重的患犬伴有呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状，呈现不同程度的脱水和渐进性消瘦。此外，母犬感染该病时多有空怀、流产、弱胎、死胎等繁殖机能障碍。
自然感染犬脑、心、肺、肝、脾、肾、肠道等均表现溶血性病变，脑组织充血、水肿，心肌变性、坏死，肝、脾组织中吞噬细胞含铁血黄素沉着等病理组织学变化。表明溶血是附红细胞体病的病理特征。华修国复制脾切除犬的附红细胞体病，其病理组织学变化与自然感染相似。肝、肠绒毛上皮和腺上皮、肾小管等组织的细胞出现浑浊肿胀和水泡变性，病变以肝脏最严重，还有心肌和横纹肌肌纤维断裂及颗粒变性、肺泡扩张等。
有学者将附红细胞体感染强度分为轻、中、重度三级，平均100个红细胞中有30个以下被附红细胞体寄生者为轻度，30个～60个者为中度，60个以上者为重度[12]。也有学者将被检红细胞1%～29%被感染时作为Ⅰ级(轻度)， 30%～50%为Ⅱ级(中度)，大于50%为Ⅲ级(重度)。
5 实验室检查
5.1 血压片检查
采患犬血液加入等量生理盐水稀释，取其1滴压片后用油镜1 000倍暗视野镜下观察，可见到游离在血液中的附红细胞体呈环状、球状、短杆状、半月状等多形态的折光小体在血浆中呈现摆动、伸曲、翻滚等运动，另外可观察到一个到多个被附红细胞体小体吸附到红细胞的表面，以及少数变形的红细胞。该方法简单易行，操作简便，但经某些学者临床观察发现，血压片方法有时在感染发病后血压片中无法找到病原体，因此在诊断过程中，易产生假阴性结果。
5.2 血涂片检查
取患犬耳静脉血滴于载玻片上，制成血液涂片，用瑞氏姬姆萨染色后在1 000倍的油镜下可观察到许多圆形、椭圆形、短杆状蓝色小体附着在红细胞上，特别严重时可见红细胞变成空泡状。另据郑丽艳等[16]报道，采用吖啶橙染色，荧光显微镜下观察在红细胞边缘出现淡绿色荧光小体者为阳性，这种方法检出率较高，非常有效，值得推广。<SPAN style="FONT-SIZE: 12pt; mso-font-kerning: 0pt; mso-bidi-font-family: 'Couri
