中国农业大学动物医学院 国家动物海绵状脑病实验室， 北京 海淀100094
鸡鹦鹉热衣原体病是由鹦鹉热衣原体引起的一种接触性人兽共患传染病。在自然条件下，肉鸡可感染本病，肉雏鸡表现沉郁、呼吸困难，甩鼻、采食量下降，常常呈恶病质状态，最终衰竭死亡，耐过鸡只生长受阻，给肉鸡生产造成了巨大的损失。禽源鹦鹉热衣原体株对人有致病性，人感染后主要表现为非特异性流感样症状，可导致肺炎、心内膜炎和脑炎等多种病症，严重威胁着人类的健康。
鹉热衣原体病组织病理学变化，国外学者已进行了近40年的研究报道，但是关于肉鸡鹦鹉热通讯作者：赵德明，Email:Zhaodm@cau.edu.cn衣原体病的组织病理学变化，国内外均报道甚少。本研究在前期病原学与血清学诊断的基础上，进一步对自然发病艾维茵肉鸡病例和经鉴定的BJF5株人工感染SPF鸡病例及人工感染饲养于隔离器中的艾维茵肉鸡病例，进行了组织病理学观察，通过对自然病例、人工发病病例及一次实验性感染与反复实验性感染的肉鸡与SPF鸡病例的病理学变化的比较观察，旨在为肉鸡鹦鹉热衣原体病的致病机理和防治提供基础数据，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1．1 主要仪器 BMJ1生物组织包埋机；MICROM HM315组织切片机；MICROM HM5 760XH 染色机；OLYMPUSBHS显微镜；LSIⅢ型硬壁式不锈钢有差异，并且和性腺及生活环境的变化密切相关，但通常有其一定的稳定性。从本试验结果来看，各组之间血液垂体促性腺激素含量差异的不显著可能是由于动物所处的发情周期、年龄的不同或者是下丘脑垂体性腺轴负反馈调节而引起。
1．2 主要试剂及菌种 衣原体病间接血凝(IHA)试验诊断试剂盒购自中
国农业科学院兰州兽医研究所。攻毒用鹦鹉热衣原体株（BJF5）由中国农业大学实验动物所分离并经北京微生物流行病研究所鉴定。
1．3 验动物 1日龄艾维茵健康肉鸡200只（抗体阴性），购自北京海淀永丰肉鸡饲养场；1日龄SPF鸡200只，由北京市实验动物中心提供。
1．3．1 自然病例的组织病理学观察 具有典型临床病症并经衣原体血凝诊断盒测定抗体阳性的北京某鸡场35日龄艾维茵肉鸡群中，采集50只典型病例的肺、肝、气管、肾、心脏、法氏囊等器官。一份用中性福尔马林溶液固定，另一份作细菌学检查。
1．3．2 人工感染SPF鸡病例/人工感染饲养于隔离器中的艾维茵肉鸡病例的组织病理学观察 用经鉴定鹦鹉热衣原体分离株（BJF5）分别一次实验感染和重复实验感染SPF鸡（200只）/人工感染饲养于隔离器中的肉鸡（200只），将实验鸡只随机分为4组，每组50只，按照文献方法将感染鹦鹉热衣原体的鸡胚卵黄囊膜研磨，经2000 r/min离心15 min，取中层悬液10倍稀释，试验组腹腔注射0.5 ml/只，对照组腹腔注射灭菌生理盐水0.5 ml/只：第1组鸡于7日龄感染衣原体；第2组于35日龄感染衣原体；第3组鸡于7日龄感染衣原体后，于35日龄重复接种一次；第4组为对照组，不感染衣原体，对照组应分别在7日龄和45日龄与感染组同时取材。人工感染后连续观察10天，对每个感染组的典型发病病鸡采取10例，采集肺、肝、气管、肾、心脏、法氏囊等器官，一份用中性福尔马林溶液固定，另一份作细菌学检查。〖JP〗
1．4 方法 将待检组织用中性福尔马林溶液固定48 h以上，常规石蜡切片，H.E.染色。
1．5 细菌学检查 无菌取病鸡肺、肝分别接种于血琼脂培养基和营养琼脂及厌气肉肝汤，置温箱37℃培养24 h。
2 结果
2．1剖检病变 剖检可见临床发病肉鸡与人工发病鸡只均表现为肺充血、水肿，单侧或双侧肺有纤维素性渗出物，肺边缘粘连。单侧或双侧气囊混浊、增厚，气囊表面有点状、散在分布的黄白色纤维素性渗出物。肝脏肿大、质脆、色变淡，偶见坏死灶，后期出现肝周炎。
早期心脏未见肉眼病变，后期心外膜增厚,有纤维素性渗出物，出现心包炎。气管喉头常见有大量黏液，少数病例出现严重的气管炎。肾脏肿大、出血。所有鸡只法氏囊未见肉眼病变。轻症者仅单侧肺边缘及单侧气囊有轻微病损。
此外，人工感染SPF鸡/人工感染饲养于隔离器中的肉鸡，一次感染组和重复感染组鸡只，在临床上均表现出厌食、精神不振、呼吸困难和喜蹲卧；尸体剖检，两者的病损无明显差异。对照组未见任何临床症状和眼观病变。
2．2 织病理学观察
2．2．1 然病例的组织病理学观察 脏(50/50 分母为观察例数，分子为病变例数，下同)：肺呈现出血、水肿，肺小叶间隔增宽，二、三级支气管内有嗜中性粒细胞和淋巴细胞浸润，网状细胞大量增殖；个别二、三级支气管内有大量蛋白分泌物，形成透明膜，并有大量的网状细胞、单核细胞浸润。肝脏(35/50)：肝脏多处淤血、出血，肝细胞变性，肝窦隙中有大量的淋巴细胞浸润，形成局灶性淋巴细胞增生灶。肾脏(25/50)：肾小球萎缩，数量减少，远区小管局部结构破坏，并有蛋白样渗出物。气管(46/50)：假复层柱状纤毛上皮细胞脱落非常明显，个别区域纤毛消失，黏液腺分泌旺盛，局部黏液腺结构破坏，在固有层间隙有淋巴细胞浸润。心肌：肌纤维未见异常病变。法氏囊：未见异常病变。
2．2．2 工感染SPF鸡病例/人工感染饲养于隔离器中的艾维茵肉鸡病例的组织病理学观察次感染组和重复感染组鸡只组织病理学变化无明显差异。肺脏(20/20)：肺严重出血，肺小叶间隔增宽，二、三级支气管内有单核细胞和淋巴细胞浸润（图1）。肝脏(15/20)：肝细胞颗粒变性，胞核溶解消失，胞浆内出现空泡，肝窦水肿出血，局部肝索结构破坏，有大量单核细胞和淋巴细胞浸润，形成淋巴细胞增生灶。肾脏(10/20)：个别肾小体结构破坏，并有大量淋巴细胞浸润，肾小管上皮细胞明显严重颗粒变性，变性肾小管周围有大量嗜中性粒细胞浸润。气管(20/20)：气管黏液腺分泌旺盛，假复层柱状纤毛上皮细胞脱落，纤毛消失。。心肌：心肌纤维未见异常病变。法氏囊：未见异常病变。对照组肺、肝、气管、肾、心脏、法氏囊等器官未见异常组织学病变。
2．3 变评分和病理统计。
2．4 菌学检查 见细菌生长。
3 讨论
3．1 于禽鹦鹉热衣原体的宿主 部禽可作为禽鹦鹉热衣原体病的实验宿主，Meyer列出了大约130多种禽类可作为禽鹦鹉热衣原体病的自然宿主。国外学者Bankowski等研究发现，鸡对鹦鹉热衣原体不敏感，是禽类中能够抵抗鹦鹉热衣原体的宿主，自然感染鸡只常常呈一过性或隐性感染；而Bracewell连续10年对鸡血清学调查发现鸡鹦鹉热衣原体阳性感染率为1.5%；同时，我国学者于维军等研究表明，鸡不但是鹦鹉热衣原体的自然宿主和实验宿主，而且还通过人工感染试验证实了鸡不仅对鹦鹉热衣原体敏感，而且还可引起急性致死性衣原体病，给养鸡业造成巨大经济损失。本研究在前期病原学与血清学诊断的基础上，成功地用经鉴定的BJF5株人工感染SPF鸡与人工感染饲养于隔离器中的肉鸡，也进一步证实了肉鸡是鹦鹉热衣原体的自然和实验宿主。
3．2 关于禽鹦鹉热衣原体自然感染和试验性感染的病理组织学变化〓禽鹦鹉热衣原体病是一种全身性疾病，疾病的发生、临床病征和病变程度差异依据易感禽的种类、敏感性、年龄以及流行株毒力的强弱不同而不同。有文献报道雏禽对该病最敏感，而肉鸡反复感染鹦鹉热衣原体在临床上较常见，发病日龄多在15～50日龄，病程10～15天。本研究通过对人工感染病例与临床自然发病病例的病理学观察比较发现，两者的病理组织学变化基本一致。人工感染SPF鸡和饲养于隔离器中的肉鸡，二者感染组与对照组差异均显著，而一次感染组和重复感染组鸡只病损程度均无明显差异，病理组织学变化基本一致。鹦鹉热衣原体攻击的靶器官是多样性的，其组织学病变主要集中在肺脏、气囊、肝脏、气管和肾脏。病变组织学特征主要为肺充血、水肿，在二、三级支气管中有蛋白分泌物与透明膜形成。肝细胞变性，肝窦隙有淋巴细胞与单核细胞浸润。肾小管上皮细胞变性、变性肾小管周围有大量嗜中性粒细胞浸润。气管黏液腺分泌旺盛，假复层柱状纤毛上皮细胞脱落，纤毛消失。上述这些病变特征均于文献观察结果相似。上述观察结果是否与肉鸡随着日龄的增长而对鹦鹉热衣原体抵抗力也随之增强，或临床反复感染鹦鹉热衣原体的耐过肉鸡，其抵抗力也会稍有增强等因素有关，还有待于进一步的研究。
3．3 关于禽鹦鹉热衣原体感染与禽大肠杆菌感染的鉴别诊断 鸡鹦鹉热衣原体病的某些临床症状和剖检病变与大肠杆菌病极为相似，尤其本病后期易出现肝周炎和心包炎，因此在临床诊治中需作实验室的鉴别诊断：病鸡肝脏接种鲜血琼脂、营养琼脂和肉汤培养基培养后无细菌生长，同时作肝脏触片，姬姆萨染色可观察到鹦鹉热衣原体包涵体，可初步确定鸡感染鹦鹉热衣原体而不是大肠杆菌，有必要还可进一步作病原分离鉴定及动物回归试验。此外，大肠杆菌感染后的病鸡，剖检法氏囊通常萎缩，质地较硬，镜检可见滤泡体积缩小，淋巴细胞数目减少。而感染鹦鹉热衣原体的病鸡，其法氏囊未见肉眼病变和异常组织病理学变化，这提示鹦鹉热衣原体对鸡的法氏囊无组织亲嗜性。
3．4 关于禽鹦鹉热衣原体病的防治 目前，尚无该病商品疫苗，对禽衣原
体病的防制主要采用衣原体敏感的药物，如金霉素、四环素、强力霉素和明氟奎诺龙等。
有文献报道，禽衣原体病主要诱导宿主的细胞免疫反应，因而禽衣原体组织灭活苗并不能有效地预防该病。尽管禽衣原体只有一个种，但血清型比较复杂，因此有望通过基因重组技术研制一种既可适用所有禽类鹦鹉热衣原体病，同时又可很好地激发禽的体液免疫和细胞免疫应答的新型疫苗。
4 小结
4.1 肉鸡是鹦鹉热衣原体的自然宿主和实验宿主。
4.2 鹦鹉热衣原体引起肉鸡的组织学病变主要集中在肺脏、气囊、肝脏、气管和肾脏。主要病变特点为单侧或双侧肺有纤维素性渗出物，肺边缘粘连；单侧或双侧气囊炎；后期出现肝
周炎；少数病例出现严重的气管炎。
4．3 肉鸡自然感染和实验性感染鹦鹉热衣原体的病理组织学变化基本一致，区别
在于实验性感染鹦鹉热衣原体的肉鸡病变程度比自然感染的要严重和广泛。
4.4 肉鸡实验性感染鹦鹉热衣原体，一次感染与反复感染的病理组织学变化无明显差异。
