1.农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心， 山东 青岛 266032；2.山东农业实业集团公司， 河南 周口 250001； 3.山东省胶南市畜牧服务中心， 山东 胶南 266400
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)1987年最早发现于美国,1995-1996年我国大陆从进口种猪中检出该病并分离到病毒。目前,该病在世界大部分地区已经广泛流行。由于用弱毒苗防疫后存在毒力返强或隐性发病的缺点，灭活疫苗正受到越来越多的养殖场（户）的青睐。为预防和控制该病，自2002年以来，我们进行了猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的研究。经临床应用表明，该疫苗能有效地预防和控制由PRRSV感染引起的疫病。报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料 PRRSV毒种：山东省某猪场的流产死胎中分离，TCID-50为10-7.0/0.1 ml。由农业部动物检疫所分离、鉴定、筛选、保存和供应。PRRS ELISA抗体检测试剂盒：由本中心提供。Marc-145细胞,由本中心保存。
1.2 实验动物 新生仔猪、断奶仔猪及妊娠母猪均来自非免疫健康猪群。经ELISA抗体检测PRRS抗体均为阴性,在严格隔离条件下试验。
1.3 疫苗制备 将PRRSV强毒接种于37℃培养24～36 ｈ长成的细胞单层,当细胞病变(ＣＰＥ)达80%以上时,收获病毒培养液。经检验符合要求后,加入甲醛溶液灭活。然后与油佐剂按照一定比例乳化而成。疫苗的成品检验和安全性检验按照《猪生殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的研制和安全性试验》（待发表）进行，共试制4批疫苗，经检验合格。从4批疫苗中任意选择其中3批（批号分别为：030311、030327、030410）进行免疫性和保存期试验。
1.4 免疫效力试验
1.4.1 妊娠母猪 选经产母猪15头, 3头设为空白对照，剩余12头随机分为3组，每组4头。3批疫苗分别于配种前每头肌肉注射2 ml，28天后同种方法加强免疫1次。分别采集免疫前、首免后4周、加强免疫后3周、8周的血清，检测抗体滴度。于妊娠90天左右攻毒,每头猪经耳静脉注射10-7TCID-50/0.1 ml PRRSV强毒2 ml、滴鼻2 ml。到预产期前4天将免疫猪及对照猪剖杀,检查每窝胎儿发育状况。
1.4.2 断奶仔猪免疫效力试验 将疫苗以1 ml剂量分别注射30日龄健康断奶仔猪各6头,设
空白对照4头。28天后攻毒,每头猪经耳静脉注射10-7TCID50/0.1 ml PRRSV强毒2 ml、滴鼻1 ml,观察21天,计算保护率。
1.4.3 初生仔猪 选用健康1日龄初生仔猪3窝,每窝10头猪,3批疫苗分别注射1窝中的7头仔猪,各注射1 ml,留3头作为空白对照。于免疫后28天各免疫猪连同对照猪经耳静脉注射10-7TCID-50/0.1 ml PRRSV强毒1 ml、滴鼻1 ml攻毒,观察21天，计算保护率。
1.5 疫苗保存期试验 用保存12～15个月的疫苗（2～8℃保存）3批，分别对实验猪（为断奶后7～15天仔猪）注射免疫2次（2次免疫间隔18天），二免后25天采血分离血清，检测抗体滴度，同时按照1.4.2进行攻毒。观察实验猪的临床反应，同时设非免疫对照。
2 结果
2.1 免疫效力试验结果
2.1.1 妊娠母猪 妊娠母猪首次免疫28天后,实验猪PRRS抗体均有不同程度的升高，二免后3周抗体滴度上升较快，但在二免后8周左右抗体一般不再上升，维持在较高的水平，S/P值约在2.8左右。3批疫苗免疫12头母猪剖杀统计胎儿数,共获取胎儿120头,其中健活胎为118头,死胎2头，存活率为98.3%。3头非免疫对照猪共怀胎31头,但健活胎儿仅3头,死胎及弱胎高达28头,而存活率仅为9.7%。试验结果见表1。
2.1.2 断奶仔猪 将3批疫苗以1 ml剂量分别注射30日龄健康断奶仔猪各6头,设空白对照4头。28天后攻毒，仔猪保护数均为6/6,保护率为100%。在临床观察期间,免疫猪无任何不良反应,而未免疫对照仔猪出现厌食、腹泻、严重的呼吸道症状,与对照组相比,呼吸道症状指数明显升高(P≤0.05)，28DPI时,存活猪临床恢复正常。
2.1.3 1日龄初生仔猪免疫效力试验结果3批疫苗分别免疫1日龄初生仔猪,28天后攻毒,在攻毒后第3天，除030327批次疫苗免疫猪有1头出现轻微呼吸道症状、不愿吃奶并伴有拉稀症状外，其他实验猪均未发现异常反应。而对照组3组的对照仔猪均出现较典型的症状，表现为严重的呼吸道症状，咳嗽、体温升高、厌食、腹泻，共死亡3头。其余6头陆续康复，但相对同龄健康仔猪消瘦，并有个别始终轻微咳嗽。
2.2 疫苗保存期试验结果 3批不同保存期的疫苗（030311，保存15个月；030327，保存13个月；030410，保存12个月）试验8头猪抗体滴度均较高，除1头仔猪发病外，其他免疫猪均健康无异常。而对照组(4头)均出现不同程度的呼吸道症状，抗体检测阴性。
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